Дифференциальный клостридиальный агар –
DCA agar acc. to Weenk et al. for microbiology
Кат.№1.10259.0500
Упаковка – 500 г
Среда предназначена для подсчета сульфитредуцирующих клостридий в продуктах.
Принцип действия
Среда содержит богатую питательными веществами основу, включающую крахмал для лучшего прорастания спор. В качестве редокс-индикатора добавлен резазурин, вызывающий покраснение среды при высоком редокс-потенциале, указывающее на присутствие кислорода. Сульфит и источник железа служат индикаторами. Сульфитредуцирующие клостридии образуют сульфид из сульфита, который дает черный осадок в присутствии ионов железа. Сульфитредуцирующие клостридии образуют на этой среде черные колонии.
Приготовление
Растворить 41,5 г среды в 1 литре дистиллированной воды, дать среде набухнуть в течение 20-30 минут. Автоклавировать 15 мин при 121°С.
Среду охладить примерно до 48°С и непосредственно перед использованием внести:
1) 5 мл/л свежеприготовленного раствора цитрата аммонийного железа (1 г в 5 мл дистиллированной воды, стерилизация 15 мин при 121°С) и
2) 7,5 мл/л раствора сульфита натрия Na2SO3x7H2O (0,7 г в 7,5 мл дистиллированной воды; стерилизация - холодная, через мембранные фильтры).
Полностью готовая среда - от желтоватого до красновато-коричневого цвета.
Готовая среда хранению не подлежит. Основа среды может храниться при 4°С до двух недель. рН 7,6±0,2 при 25 °С.
Проведение анализа
1 мл исследуемого образца засевают в чашку. После застывания среду в чашке заливают слоем стерильного Дифференциального клостридиального агара. Инкубируют около трех дней при 30°С анаэробно (с использованием газогенерирующих пакетов Anaerocult®-A, Anaerocult® А-мини, Anaerocult®-P).
Интерпретация результатов
Сульфитредуцирующие клостридии образуют изолированные черные колонии диаметром 1-5 мм. Для лучшего прорастания спор рекомендуется прогревание исследуемого материала при 75°С в течение 10 мин перед инокулированием среды.